Polysciences全國代理-上海鼎桑
更新時間：2024-08-14
Polysciences全國代理-上海鼎桑 美國POLYSCIENCES公司成立于1961年，主要生產(chǎn)和經(jīng)營LIFE SCIENCES生命科學(xué)（膠體金,不含甲醛的甲醇等），病理學(xué)和顯鏡學(xué) 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產(chǎn)品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供應(yīng)商,同時是世界*的免疫學(xué),組織化學(xué)試劑耗材供應(yīng)商.
| 產(chǎn)地 | 進口 | 加工定制 | 否 |
|---|
我們公司zui大優(yōu)勢是強大的采購：
上海鼎桑生物科技有限公司一家專注于生命科學(xué)的科技企業(yè)，由在國內(nèi)科研試劑領(lǐng)域有著豐富從業(yè)經(jīng)驗的技術(shù)團隊和管理團隊組建而成，專營進口生物試劑，科學(xué)儀器，實驗消耗品等。
公司將不斷把上優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品引入國內(nèi)市場，滿足客戶的需求，公司也將緊跟生命科學(xué)的發(fā)展，為廣大科研工作者探索生命科學(xué)的奧秘奉獻綿薄之力.
Polysciences全國代理-上海鼎桑
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PEI轉(zhuǎn)染手冊
轉(zhuǎn)染操作流程：
1、細(xì)胞傳代：
轉(zhuǎn)染前24h內(nèi)分離293T細(xì)胞至含10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基 中進行傳代培養(yǎng)，接種密度如下：
6孔板：0.5x106細(xì)胞
10cm培養(yǎng)皿：4.0x106細(xì)胞
15cm培養(yǎng)皿：9.0x106細(xì)胞
2、轉(zhuǎn)染
轉(zhuǎn)染前將所有試劑置于室溫。
2.1質(zhì)粒DNA的稀釋
在無菌試管中，用無血清的DMEM W / O酚紅培養(yǎng)基（濃度為10％）稀釋質(zhì)粒DNA（ug）。病毒包裝體（psPAX2）：病毒包膜（pMD2G）和重組質(zhì)粒DNA的稀釋比例分別為4:2:1。
6孔板：200ul+3ug的DNA
10cm培養(yǎng)皿：1ml+7-8ug的DNA
15cm培養(yǎng)皿：2ml+11-12ug的DNA
2.2 轉(zhuǎn)染復(fù)合體形成
將PEI（1ug/uL）加入已稀釋的總DNA中，PEI與DNA（ug）的混合比率為3:1。加入后立即渦旋混合。
6孔板：9ul PEI復(fù)合體（1ug/ul）=9ug
10cm培養(yǎng)皿：21ul PEI復(fù)合體（1ug/ul）=21ug
15cm培養(yǎng)皿：33ul PEI復(fù)合體（1ug/ul）=33ug
將添加到細(xì)胞的DNA/ PEI的混合物在室溫下孵育15分鐘。
4、收獲轉(zhuǎn)染細(xì)胞
轉(zhuǎn)染后48小時內(nèi)收獲轉(zhuǎn)染細(xì)胞/或病毒上清。
試劑的配制：
PEI（1ug/ul） Polysciences（CAT＃23966-2配制成儲液：)
1、將無內(nèi)毒素的無菌水加熱至80℃左右溶解PEI，冷卻到室溫。
2、調(diào)整pH值至7.0，用0.22um的濾器過濾消毒，分裝后儲存在-20℃。工作液可保持在4℃
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